کشت سلولابزاری بسیار کاربردی در بررسی سوالات پایه علمی و تحقیقاتی ترجمه است. مزیت استفاده از رده های سلولی در تحقیقات علمی، همگن بودن و تکرارپذیری مرتبط با آن در داده های تولید شده است. این فصل اصول راه اندازی یک آزمایشگاه کشت سلولی و دستورالعمل هایی را معرفی می کند که ایمنی پرسنل آزمایشگاه و همچنین سلول های کشت شده را تضمین می کند. همچنین به آلایندههای میکروبیولوژیکی بالقوه و نحوه اجتناب از آنها و همچنین شناسایی زودهنگام آنها میپردازد. از آنجایی که انتخاب یک رده سلولی خاص و شرایط کشت سلولی خاص به بازخوانی روش مورد نظر بستگی دارد، این فصل یک مرور کلی از اجزای کشت سلولی رایج پستانداران و خواصی که به یک ریزمحیط کشت سلولی مناسب کمک میکند، ارائه میکند. در نتیجه، این فصل چندین تکنیک را بیان میکند که برای تکثیر سلولی حیاتی هستند و میتوانند به راحتی با تعداد زیادی از انواع سلولها و روشهای آزمایشی سازگار شوند.
واژههای کلیدی: کشت سلولی، آسپسیس، سلول اولیه، آلودگی، محیط، مکملها، انکوباتور، سطح ایمنی زیستی، گروه خطر، نگهداری
قابل اعتماد و متخصص:
معرفی
کشت سلولبه روش های آزمایشگاهی اطلاق می شود که امکان رشد سلول های یوکاریوتی یا پروکاریوتی را در شرایط فیزیولوژیکی فراهم می کند. منشا آن را می توان در اوایل قرن بیستم یافت، زمانی که برای مطالعه رشد و بلوغ بافت، زیست شناسی ویروس و توسعه واکسن، نقش ژن ها در بیماری و سلامتی، و استفاده از رده های سلولی هیبریدی در مقیاس بزرگ برای تولید داروهای زیستی معرفی شد. کاربردهای تجربی سلولهای کشتشده به اندازه انواع سلولهای قابل رشد در شرایط آزمایشگاهی متنوع است. با این حال، در یک زمینه بالینی، کشت سلولی معمولاً با ایجاد سیستمهای مدلی مرتبط است که زیستشناسی سلولی پایه را مطالعه میکنند، مکانیسمهای بیماری را تکرار میکنند، یا سمیت ترکیبات دارویی جدید را بررسی میکنند. یکی از مزایای استفاده از
کشت سلولبرای این کاربردها امکان دستکاری ژن ها و مسیرهای مولکولی است. علاوه بر این، همگنی جمعیتهای سلولی کلونال یا انواع سلولهای خاص و سیستمهای کشت بهخوبی تعریف شده، متغیرهای ژنتیکی یا محیطی مداخلهگر را حذف میکند و بنابراین امکان تولید دادههایی با قابلیت تکرارپذیری و سازگاری بالا را فراهم میکند که نمیتوان آن را هنگام مطالعه کل سیستمهای اندام تضمین کرد.
قابل اعتماد و متخصص:
آزمایشگاه کشت سلول
ایمنی آزمایشگاهی کشت سلولی
کاربرد هیجان انگیز تکنیک های کشت سلولی در تحقیقات زیست پزشکی مستلزم مدیریت خطرات بالقوه مرتبط با عوامل عفونی موجود در سلول های کشت شده (مانند HBV یا HIV)، اما همچنین کنترل معرف هایی است که می توانند ماهیت سمی، خورنده یا جهش زا داشته باشند. این خطرات بالقوه می توانند در صورت وارد شدن به بدن (به عنوان مثال از طریق تماس پوست و غشاهای مخاطی با مواد جامد، مایعات یا ذرات معلق در هوا) سلامت کارکنان آزمایشگاه را به خطر بیندازند و در صورت استفاده نادرست محیط را تهدید کنند.
قبل از شروع هر کار کشت سلول، کاهش یا حذف قرار گرفتن در معرض عوامل بالقوه خطرناک باید اطمینان حاصل شود تا عفونت، بیماری زایی، واکنش های آلرژیک و تماس با سموم آزاد شده به حداقل برسد. این را می توان با آموزش دقیق پرسنل آزمایشگاه و اجرای روش های استاندارد کشت سلولی (جدول 9.1) به دست آورد، که باید به طور منظم توسط اعضای آزمایشگاه و کمیته ایمنی مؤسسه بررسی و بازنگری شود. علاوه بر این، هنگام کار با سلولهای اولیه که مستقیماً از بافت انسانی جدا شدهاند، غربالگری اهداکنندگانی که سلولها از آنها مشتق شدهاند برای پاتوژنهای بیماریزا مهم است. ایمن سازی های به روز در برابر بیماری های عفونی مانند هپاتیت B نیز برای کارکنان آزمایشگاهی که با سلول های اولیه کار می کنند بسیار توصیه می شود.